Analiza lichidul cefalorahidian lichidul cefalorahidian


CSF (lichidul cefalorahidian sau spinal, LCR) - Lichidul biologic necesar pentru funcționarea SNC. Cercetarile sale este una dintre cele mai importante tipuri de teste de laborator. Se compune din faze preanalitychnoho (pregătirea subiectului, materiale colectarea și livrarea de la laboratorul), analitic (executa efectiv de cercetare) și postanaliticheskoy (transcriere a rezultatului). Numai executarea corectă a tuturor manipulări la fiecare dintre aceste etape determina calitatea analizei.


Lichidul cefalorahidian (LCR) este formată în plexurilor vasculare ale ventriculelor ale creierului. In adult subarhnoidalnyh simultan în spațiu și ventricule ale creierului circulă 110-160 ml CSF în canalul spinal - 50-70 ml. CSF produs în mod continuu cu o viteză de 0,2-0,8 ml / min, în funcție de presiunea intracraniană. În ziua într-o persoană sănătoasă este formată 350-1150 ml CSF.

Lichid cefalorahidian obtinut prin punctie a canalului spinal, cele mai multe ori - lombare - în conformitate cu metodele bine cunoscute neurologi și neurochirurgi. Primele sale picaturi eliminate ("track" sânge). Apoi CSF colectate cel puțin 2 tuburi: în tub regulat (chimice, tsentryfuzhnuyu) pentru analiza clinică și chimice generale, sterile - pentru studiu bacteriologic. Pe studiul formă de sesizare doctor CSF ar trebui să specifice nu doar numele pacientului, și diagnosticul clinic și scopul cercetării.

Trebuie amintit faptul că probele furnizate CSC laborator ar trebui să fie protejate de perhrevaniya sau ohlazheniya și probe concepute pentru a detecta teste polizaharide bacteriene serohicheskih ar trebui să fie cald într-o baie de apă timp de 3 min.

De fapt, testele de laborator CSF (faza de analiză) este realizată în conformitate cu normele adoptate în diagnosticarea de laborator clinic în analiza unor fluide biologice și cuprinde următoarele etape:

- Analiza macroscopică - evaluarea proprietăților fizico-chimice (de volum, culoare, caracter)

- numărarea celulelor
- Microscopie de droguri nativ și colorate citologie droguri;
- biochimice,
- Studiile microbiologice (de semnalizare).

Găsim corespunzătoare și informative, în unele cazuri suplimenta CSF cercetare imunologice si, probabil, - în alte teste, a cărei semnificație este discutată în literatura de specialitate.

Indicatorii Explicație lichior

Incolor normală CSF și porozrachna (ca apă distilată, în comparație cu care, de obicei, descriu proprietățile fizice ale lichior).

Gri sau gri-verde băuturi este, de obicei cauzate de bacterii mixte si leucocite. Culoarea roșie de diferite CSF intensitate (eritrohromiya) din cauza amestec de celule rosii din sange, care se găsesc în stare proaspătă sau hemoragii leziuni cerebrale. Relevat vizual prezența celulelor roșii din sânge, atunci când dețin mai mult de 500-600 ml.

În procese patologice lichid poate fi ksantohromnyy - vopsite cu produse de dezintegrare galben sau galben-brun de hemoglobină. Ar trebui să fie amintit, și ksantohromii false - CSC culoare droguri induse. Rareori ne întâlnim CSF verzuie de culoare (meningita purulenta, abces cerebral). Literatura de specialitate este descris de culoare korchnevyy și băuturi alcoolice - chisturi Breakout kraniofarinhiomy în mod lichidul cefalorahidian.

CSF turbiditate se poate datora amestec de celule sanguine sau microorganisme. In ultimul caz turbiditatea poate fi îndepărtat prin centrifugare. Când conținutul LCR cantități crescute de fibre brute devine opalestsyruyuschey.

Densitatea relativă a lichidului cefalorahidian obtinut prin punctie lombara, 1,006-1,007. Când inflamația meningelui, leziuni cerebrale densitatea relativă lichid cefalorahidian creste la 1.015. Scade cu supraproducție de lichid cefalorahidian (hidrocefalie).

Cu creșterea conținutului de fibrinogen în lichidul cefalorahidian este format de film fybrynoznoy sau cheag care apare mai des la meningita tuberculoza. Uneori tubul de lichid lăsată la temperatura camerei timp de o zi (dacă este necesar să se verifice - formate sau folie?). În prezența fybrynoznoy peliculă transferat ac preparovalnoy pe o lamelă de sticlă și colorate cu Tsilem-Nielsen sau altă metodă pentru detectarea micobacteriilor. CSF normală pentru 98-99% din apă.

Cu toate acestea, studii de compoziția sa chimică este o sarcină importantă. Aceasta include determinarea nivelului de proteine, glucoză și clorură și în unele cazuri completată cu alți indicatori.

Proteina din lichidul cefalorahidian

Peste 80% din CSF provine din plasmă prin ultrafiltrare. Conținutul de proteină este normal în diferite porțiuni: o ventriculară - 0,05-0,15 g / l, tsysternalnyh 0,15-0,25 g / l, lombare 0.15-0.35 g / l. Pentru a determina concentrația de proteină în lichidul cefalorahidian poate fi folosit cu orice metode uniforme (cu acidul sulfosalytsylovoy și sulfat de amoniu, etc.). Nivelurile crescute de proteine ​​in lichidul cefalorahidian (hiperproteinarhiya) se poate datora unor factori diverși patogenice (Tabelul 1).

Studiul CSF nu poate specifica doar natura procesului patologic, dar și pentru a evalua starea de bariera hemato-encefalică. Un indicator în acest sens poate fi albumină, cu condiția ca nivelul său este determinat într-o cefalorahidian abordari imunologice fluide. Determinarea albumina se realizează datorită faptului că el, fiind o proteină din sânge, nu sintetizat local și, prin urmare, poate fi un "marcator" de anticorpi care infiltrat de sange ca urmare o tulburare a barierei permeabilitate. Determinarea simultană a albumină serică (plasma) sange si proteine ​​lichidul cefalorahidian ne permite calcularea indicelui:

 

In acest yntaktnom indice BBB mai puțin de 9, cu deteriorarea acesteia moderate - 9-14, cu o marcată - 14-30, cu leziuni severe - 30-100, și o creștere de mai mult de 100 de puncte pentru a înfrângerea completă a barierei.

In ultimii ani, interesul pentru specific CNS proteine ​​lichior crescut - neyronspetsyfichna enolaza, S-100 proteine, proteina bazică a mielinei (MBP) și altele. Unul promițătoare dintre ele în scopuri clinice pare MBP. În lichidul cefalorahidian normală este practic absentă (concentrația nu depășește 4 mg / l) și apare doar in boala. Această caracteristică de laborator nu este specific pentru anumite entități care însă reflectă dimensiunea leziunilor (mai ales asociat cu distrugerea materiei albe). Unii autori consideră MBP determinare potențial în LCR de monitorizare neyroSPYD. Din păcate, rămân în continuare probleme legate de determinare directă a concentrației de proteine.

Glucoză în lichior

Glucoză găsit în lichidul cefalorahidian normal într-o concentrație de 2.00 - 4.18 mmol / l. Această valoare este supusă fluctuațiilor semnificative chiar și în oameni sănătoși, în funcție de regimul alimentar, activitatea fizică și alți factori. Pentru stabilirea corectă a nivelului de glucoză din LCR recomandat simultan și determină nivelul din sânge, în cazul în care în mod normal este de 2 ori mai mare. Niveluri ridicate de glucoza din sange (hiperhlikoarhiya) are loc in diabetul zaharat, encefalita acuta, tulburari circulatorii ischemice și alte boli. Hipohlikoarhiya observată la meningita etiologie diferită sau inflamație aseptică, tumori ale creierului si membranele, cel puțin - în infecția cu herpes, hemoragia subarahnoidiană.

Unele avantaj asupra glucozei ca un marker de diagnostic este lactat (acidul lactic), deoarece concentrația în fluidul cerebrospinal (1,2-2,1 mmol / l) nu depinde de astfel de niveluri. Nivelul său este crescut în mod semnificativ în diferite state legate de încălcarea de metabolismului energetic - menynhytah - in special cauzate de flora gram-pozitive, hipoxie creier și altele.

Clorură în lichidul cefalorahidian

Clorură - conținut în lichidul cefalorahidian normal - 118-132 mg / dL. Creșterea concentrației în lichidul cefalorahidian se observă cu încălcarea eliminarea acestora din organism (boli de rinichi, boli de inima), boli degenerative si tumori ale sistemului nervos central. Reducerea de clorură de observat în encefalita si menynhytah.

 

Enzime în lichior

CSF este caracterizat de o activitate redusă a enzimelor conținute de acesta. Schimbarea activității enzimei în lichidul cefalorahidian în diferite boli sunt evoluții în mare parte nespecifice și paralele descrise în sângele acestor boli (Tabelul 2). O altă abordare merită interpretare modifică activitatea creatin fosfokinazei (CPK). Această enzimă este prezentat în țesuturile cele trei fracțiuni care sunt caracterizate nu numai diferențe moleculare, ci și natura distribuirii în țesutul, CK-MB (miocard), CK-MM (mușchi), CK-BB (creier). Dacă CPK total activitate în lichidul cefalorahidian are o valoare de diagnostic fundamentală (aceasta poate fi crescută în tumorile, infarctul cerebral, epilepsie si a altor boli), fracția CPK-BB este destul de marker specific de deteriorare a tesutului cerebral si activitatea in CSF se corelează cu amploarea Glasgow.

Numărul de celule și CSF tsytohrama

În studiul de fluide biologice, LCR, inclusiv, numărate desigur numărului de celule și frotiurilor tsytohramy azureozinom colorate (cu Romanovsky-Himza, Nohta, Pappenheym). Calculul elementelor celulare în lichidul cefalorahidian (cytosis definiție) produse de camera Fuchs-Rosenthal, după ce a aruncat reactiv lui Samson 10 ori. Utilizarea acestui colorant, și nu o alta. permițând celule pentru vopsirea timp de 15 minute și să păstreze celulele intacte timp de 2 ore.

Numărul de celule din celule întregi împărțit la 3, asa ca cytosis în 1 ml. Pentru o mai mare precizie cytosis găsi trei camere. În absența camerei Fuchs-Rosenthal pot folosi camera Goryaeva prin numărarea celulelor peste grila ca în trei celule, rezultatul se înmulțește cu 0,4. Până în prezent, există discrepanțe în unități cytosis - numărul de celule într-o celulă, 1 ml sau 1 litru. Probabil, încă recomandabil să-și exprime numărul cytosis de celule pe ml. Pentru numărarea numărului de globule albe și globule roșii lichidul cefalorahidian poate fi utilizat sisteme automate.

Creșterea de celule din LCR (pleiocitoza) apare mai frecvent la bolile inflamatorii, într-o măsură mai mică - în iritarea meninge. Pleiocitoza mai pronunțată observate in infectii bacteriene, fungice leziuni ale creierului si meningita tuberculoasa. În epilepsie, arahnoydyte, hidrocefalie, procese degenerative și alte boli ale cytosis CNS rămâne normală.

Celulele Pictura nativ pregătire reactiv Samson permite suficient de celule diferențiate în mod fiabil. Dar mai exacte caracteristicile lor morfologice realizate după fixare și colorare citologice preparate gătite. Abordarea modernă la elaborarea unor astfel de medicamente implică utilizarea tsitotsentrifuhi. Cu toate acestea, chiar și în Statele Unite sunt echipate cu doar 55% din laboratoare. Prin urmare, în practică, utilizat un mod mai simplu - depunerea de celule pe o lamelă de sticlă. Pregătirile trebuie să fie bine uscate în aer și apoi vopsit.

 

În preparate colorate sunt de numărare a elementelor celulare. Acestea sunt în principal celule sanguine (de obicei - limfocite și neutrofile, cel puțin - monocite, eozinofile, bazofile), plasma pot întâlni și mastocite, macrofage, bile granulare (forme degenerative un tip special de macrofage - lipofahi o stare de degenerare grasă) celule arahnoendoteliya, epindimy . Morfologia acestor elemente celulare în general bine cunoscute medici si diagnostic de laborator este descrisă în detaliu în multe manuale. Nivelul și natura pleotsitoz tsytohramy permite lichior de a clarifica natura procesului patologic (Tabelul 3).

Neytrofilnyyleykotsytoz adesea însoțită de infecții acute (local și meningita difuză). CSF eozinofilie apare rar - dacă Echinococoza meningita eozinofilica creier. CSF eozinofilie nu se corelează în general cu numărul de eozinofile din sânge. Limfocitara pleiocitoza LCR apare în meningita virala, scleroză multiplă, în faza cronică a meningita tuberculoasa dupa o interventie chirurgicala pentru membrane de creier. In procesele patologice în sistemul nervos central marcat polimorfism al limfocitelor, printre care sunt activate. Ele sunt caracterizate prin prezența citoplasmă abundentă cu granule azurofilnoy unice faintish, unele celule au vidshnuruvannyam sau fragmentarea citoplasmei (klazmatoz). Celulele plasmatice apar în tsitohramme în meningita virala sau bacteriana, proceselor inflamatorii lente în perioada de recuperare la neyrosyfylyse. Monocite curs de degenerare în lichior repede Limfocitele observate în scleroza multiplă, panentsefaliti progresiv, procese inflamatorii cronice lent. Macrofage - "infirmieri" CSF apar cu hemoragii, infectii, necroza traumatice si ischemice.

Uneori LCR sunt celule anormale - elemente care, în caracteristicile lor morfologice nu pot fi creditate în anumite forme celulare. Celule atipice se gasesc in procese inflamatorii cronice (meningita tuberculoasa, scleroza multipla, etc.), și de multe ori acestea sunt celule tumorale. Probabilitatea gaseste celule canceroase în lichidul cefalorahidian in tumorile cerebrale este scăzută (mai puțin de 1,5%). Detectarea celulelor blastice în lichidul cefalorahidian în tumori maligne hematologice sugerează neyroleykoze.

În analiza LCR este importantă pentru a evalua valoarea de proteine ​​si elemente celulare (disociere). In exprimat-celule de disociere proteine ​​marcate pleiocitoza cu conținut normal sau crescut ușor proteine. Acest fapt este tipic meningita. Belkovokletochnaya disociere caracterizat hiperproteinarhiey sub cytosis normal. Această condiție este tipic pentru procesele de stagnare în moduri lichidul cefalorahidian (tumoră, arahnoidita, etc.).

Situații clinice necesită uneori numărarea numărului de celule roșii din sânge în lichidul cefalorahidian krovyanystom (pentru suma obiectivare de sângerare). Numărarea celulelor rosii din sange, precum si de plumb din sânge. Conform celor menționate anterior, culoarea se schimbă lichior, dacă există mai mult de 1 mm 500-600 eritrocite marcate colorație apare în prezența a aproximativ 2000, și devine hemoragică la nivelul celulelor roșii din sânge decât 4000 / microlitru.

Studiul microbiologic al CSF

Una dintre cele mai comune boli ale sistemului nervos central este meningita purulentă. În astfel de cazuri urgență specială de cercetare mikorobiolohicheskoe. Acesta include un test de tentativă - preparate microscopie și metodele culturale clasice. Bakteryoskopyya lichior a limitat valoarea de diagnostic, mai ales atunci când CSF transparent. Pap facut din lichior de nămol obținut prin centrifugare, okarshivayut albastru de metilen sau Gram deși unii autori cred că cea mai recentă versiune de culoare elemente "traumatice" modelare si creaza artefacte. Când meningita și abcese dezvăluit flore pe natura bolii. Oricare ar fi diagnosticul microscopie rezultatul meningitei bacteriene trebuie să fie confirmată de rezultatele culturii, care este crucială în diagnosticul acestui grup de boli și selecție de tratament adecvat. Acesta se desfășoară în conformitate cu Ordinul № 375 Ministerul rus al Sănătății a 23.12.98 "Cu privire la măsurile de consolidare a supravegherii epidemiologice și de prevenire a infecției meningococice și meningitei bacteriene purulente." Cea mai frecventa cauza de meningita bacteriana este un gram negativ dyplokokk Neisseria meningitidis, care, în 80% din cazuri pot fi detectate chiar și atunci când microscopie.

Microscopie CSF

În mod normal, prezenta doar in limfocite lichidul cefalorahidian și monocite. În diverse boli și stări patologice în lichior vor fi alte tipuri de celule.

Limfocitele sunt similare in marime cu eritrocite. Limfocitele au un nucleu mare și o cito nevopsită ramă îngustă­plasmă. În mod normal, lichior conținute 8.10 limfocite celule. Numărul acestora crește în tumori ale sistemului nervos central. Limfocitele sunt procese inflamatorii cronice în cojile (meningita tuberculoasa, tsistitserkoznom arahnoydyte).

Celulele plasmatice în lichidul cefalorahidian. Celulele mai mare de limfocite miez mare situat excentric, o multime de citoplasma și o cantitate relativ mică de miez (dimensiunea celulei - 6,12 microni). Celulele plasmatice sunt găsite doar în lichidul cefalorahidian în cazuri patologice, procese inflamatorii pe termen lung in creier si membranele, cu encefalită, meningită tuberculoasă, tsistitserkoznom arahnoydyte și alte boli în perioada postoperatorie, cu răni vindecare lent.

Monocite țesut în lichidul cefalorahidian. Dimensiunea celulelor - la 7 la 10 microni. În lichid normale, uneori poate apărea ca o singura copie. Monocitele sunt identificate in lichidul cefalorahidian după o intervenție chirurgicală asupra sistemului nervos central, a proceselor inflamatorii pe termen lung în coji. Prezența țesutului monocite sugerează o reacție tisulară activ si vindecarea ranilor normale.

Macrofagele in lichidul cefalorahidian. Pot exista diferite forme nucleu, adesea situate în periferia citoplasmei celulei de bază conține con­reducerea atât a vacuolelor. În macrofagele lichidul cerebrospinal normale apar. Prezența macrofagelor în număr normal de celule în lichidul cefalorahidian este observată după sângerare sau când procesul inflamator. Ele apar de obicei în perioada postoperatorie, care are valoare de prognostic și a declarat că lichidul de curățare activă.

Bile granulometrice în lichidul cefalorahidian. Celulele cu infiltrarea grasă - macrofage cu prezența de picături de grăsime în citoplasmă. În preparate colorate celulele CSC au puține peryferychesky nucleu situat și krupnoyacheystoy citoplasma. Dimensiunea celulelor este diferita si depinde picăturile de grăsime incluse. Gloanțe granule găsit în fluid patologic obținute din chisturi in celulele creierului degradare a țesutului cerebral in tumori.

Neutrofilele in lichidul cefalorahidian. Celula identic în sângele periferic aspect neytrofylam. Prezența neutrofilelor în lichidul cefalorahidian, chiar și în cantități minime indicate sau fostul sau existente în răspunsul inflamator. Prezența neutrofilelor alterate indică atenuarea inflamației.

Eozinofile în lichidul cefalorahidian. Determină CSC disponibile în uniformă, nisipul strălucitor. Eozinofilele sunt găsite în hemoragie subarahnoidiană, meningita, tuberculoza și tumori cerebrale sifilitice.

Celulele epiteliale din lichidul cefalorahidian. Celule epiteliale, limitarea spațiului pidpavutynovyy găsite în lichidul cefalorahidian sunt rare. Acest mari celule rotunde, cu mici, rotunde sau ovale. Nuclee Detectate in tumorile, uneori în procesele inflamatorii.

Celulele tumorale în lichidul cefalorahidian și complexul. Ele sunt în lichidul de cameră și preparate colorate. Celulele maligne pot trata aceste tipuri de tumori:

  •  meduloblastom;
  •  sponhioblastoma;
  •  astrocitom;
  •  cancerul.

Cristalele din lichior. Există în lichidul cefalorahidian rar sau dezintegrarea tumorii.

Elementele echinococcal în cârlige likvore- skoleksa, resturi coajă chitinous - în lichidul cefalorahidian sunt rare.

PCR diagnosticare lichior

În ultimii ani, unele perspective în neuroinfecțiile diagnostic etiologice asociate cu dezvoltarea de tehnologii de genetica moleculara nucleic detectarea acizilor de agenți infecțioși în lichidul cefalorahidian (diagnosticare PCR).

Astfel, CSF este un mediu clar răspunde la procesele patologice in sistemul nervos central. Adâncimea și natura schimbărilor sale se datorează adâncimii tulburărilor fiziopatologice. Laborator evaluare corectă likvorolohicheskih simptome ajută la clarificarea diagnosticului și pentru a evalua eficacitatea tratamentului.

VV UGMA profesor piata, medic-șef adjunct EDO №1